RESUMO O presente estudo investigou a indução de morte celular por apoptose pelo flavonóide morina e pelo extrato da folha de oliveira (Oleaeuropaea L.) em linhagens de células de câncer de pulmão do tipo não pequenas (H460). O tratamento com morina e o extrato de oliveira em células H460 resultou na redução do crescimento tumoral e indução de morte celular avaliados pelos ensaios de MTT e lactato desidrogenase (LDH) e a morte celular por apoptose confirmada por microscopia de fluorescência e análise por citometria de fluxo. Os dados indicaram que o flavonóide morina e o extrato de oliveira diminuíram a viabilidade celular para taxas percentuais de 7,22± 1,54% e 62,37± 2,85% nas concentrações de 800µM e µg/mL, respectivamente. As maiores taxas percentuais de morte celular por apoptose foram100% para morina na concentração de 800µM e 70,49 ± 5,91% para o extrato de oliveira na concentração de 800 µg/mL. Estes resultados foram associados com a alteração do potencial de membrana mitocondrial, cujos valores são de 54,91% para morina na concentração de 400µM e 42,2% para o extrato de oliveira na concentração de 800 µg/mL sugerindo envolvimento da via intrínseca da morte celular por apoptose. Portanto, morina e o extrato de oliveira afetaram a viabilidade celular da linhagem H460 induzindo morte celular por apoptose.

ABSTRACT This study investigates possible apoptosis induction mechanism by the flavonoid morin and the olive leaf extract (Olea europaea L.) in non-small lung cancer cells (H460). The treatment with morin and olive leaves extract resulted in growth inhibition and induction of apoptosis in H460 cells lines measured by the MTT assay methods and confirmed by fluorescence microscopy, flow cytometry analysis. The data indicated that themurin and the extract of olive decreased the cell viability percentage rates of 7.22 ± 1,54% and 62.37 ± 2,85% in the concentrations of 800 µM and µg/mL, respectively. The highest percentage rates of cell death by apoptosis were 100% for themorin in a concentration of 800 µM and 70.49 ± 5.91% for the olive extract in a concentration of 800 µg/mL. These findings were associated with altered mitochondrial membrane potential, whose value is 54.91% for the murin concentration of 400 µM and 42.2% for the olive extract in a concentration of 800 mg / mL, suggesting involvement of the intrinsic pathway of cell death by apoptosis. Therefore, the morin and the olive extract affect the cell viability of H460 cell lines inducing cell death by apoptosis.

As variantes gênicas da beta-lactoglobulina (β-LG) e da kappa-caseína (κ-CN) bovinas são associadas à produção, qualidade e características de processamento do leite. O objetivo deste trabalho foi analisar as frequências dos genótipos AA, AB e BB, por meio da técnica de PCR-RFLP, da β-LG e da κ-CN bovinas, e suas associações com a produção de leite (kg leite/dia) em bovinos das raças Girolanda, Holandesa e Jersey. Para a κ-CN, a frequência do genótipo AA foi maior nos animais das raças Holandesa (37%) e Girolanda (63%). Na raça Jersey, houve predomínio do genótipo BB (60%). Para a β-LG, o genótipo AB foi o mais encontrado nas raças Girolanda (54%) e Holandesa (58%), enquanto nos animais da raça Jersey houve predomínio do genótipo BB (45%). Houve associação do alelo B da κ-CN com maior produtividade leiteira nas raças Girolanda e Holandesa, e do alelo A da β-LG com maior produtividade de leite na raça Jersey. As variantes genéticas da κ-CN podem ser usadas como marcadores na seleção para a produtividade leiteira nas raças Girolanda e Holandesa. Para a raça Jersey, as variantes da β-LG seriam mais adequadas para essa seleção.

Bovine beta-lactoglobulin (β-LG) and kappa-casein (κ-CN) genic variants are associated with productivity, quality and processing features of milk. The objective of this study was to analyze through the PCR-RFLP technique, the frequency of AA, AB and BB genotypes of bovine β-LG and κ-CN, and their association to milk production (kg milk/day) in Girolanda, Holstein and Jersey cattle. For κ-CN, the frequency of the AA genotype was higher in Holstein (37%) and Girolanda (63%), while there was a predominance of the BB genotype in Jersey (60%). For β-LG, the BB genotype was the most found in Girolanda (54%) and Holstein (58%), while there was a predominance of the BB genotype (45%) in Jersey. There was a positive association between B allele of κ-CN and milk production in the Girolanda and Holstein cattle and between A allele of β-LG and milk production in the Jersey cattle. Genetic variants of κ-CN could be used as markers for the selection for productivity in Girolanda and Holstein cattle. The genetic variants of β-LG would be more appropriate for this selection in the Jersey breed.

Genetic diversity of Brazilian buffaloes is studied using a panel of twenty-five DNA microsatellite markers (CSSM41, CSSM8, CSRM60, CSSM33, BM1818, HEL13, MAF65, CSSME70, HSC,BRN, CSSM36, CSSM22, HAUT24, BM1824, SRCRSP8, TGLA227, ILSTS33, INRA23, BM8125, CSSM19, INRA37, CSSM66, ILSTS011, OarFCB48, SPS115). Forty samples randomly chosen from each of the Brazilian Buffaloes populations (Carabao, Jafarabadi, Mediterraneo, Murrah and Baio) were analyzed. Anyway the homogeneity test between observed and expected heterozygosity and the results of the Hardy-Weinberg equilibrium pointed out the stability of Baio and Carabao populations. Genetic distances, factorial analysis and individual assignation values showed that Baio, Mediterraneo and Murrah form a common genetic cluster as shown by their high genetic similarity in spite of their morphological divergence. That Carabao is a member of a different subspecies is confirmed. These findings demonstrate the success of Brazilian Baio and Carabao conservation efforts, and point to the need to develop new strategies of conservation for the remaining Brazilian buffalo populations.

Foi estudada a diversidade genética de búfalos do Brasil utilizando-se vinte e cinco marcadores microssatélites (CSSM41, CSSM8, CSRM60, CSSM33, BM1818, HEL13, MAF65, CSSME70, HSC, BRN, CSSM36, CSSM22, HAUT24, BM1824, SRCRSP8, TGLA227, ILSTS33, INRA23, BM8125, CSSM19, INRA37, CSSM66, ILSTS011, OarFCB48, SPS115). Foram analisadas amostras colhidas ao acaso de cinco populações, ou seja, raças Carabao, Jafarabadi, Mediterrâneo e Murrah, mais o tipo Baio. Em geral, os valores para a diferença entre as heterozigosidades (Ho - He) foram bastantes pequenas, significando equilíbrio nos marcadores utilizados para este tipo de estudo. Os valores do GST demonstraram um nível alto de diferenciação genética e os da estatística F: Fis (f), Fst (q) e Fit (F) demonstraram que os marcadores utilizados permitem inferir informações adequadas sobre as populações, podendo-se deduzir que os grupos Baio, Carabao, Jafarabadi e Mediterrâneo apresentam-se mais homogêneos que o grupo Murrah, o qual mostra níveis altos de endogamia. Os resultados dos estudos de distância genética mostraram que as populações de Baio, Mediterraneo e Murrah, agrupando-se em um cluster comum, demonstra alta similaridade genética, não obstante as suas divergências fenotípicas, confirmando que o grupo Carabao constitui uma diferente subespécie. Os resultados, principalmente das populações de Baio e Carabao, mostram o êxito do trabalho de con-servação genética e a necessidade de se desenvolver novas estratégias para a conservação do germoplasma dos búfalos do Brasil.

Este estudo avaliou a ação do extrato etanólico das folhas de Myrciaria cauliflora (Mart.)O.Berg. sobre três culturas de Streptococcus formadoras do biofilme dental. A atividade antimicrobiana foi determinada pelo método de difusão em meio sólido. Os dados obtidos foram satisfatórios para todas as espécies ensaiadas (Streptococcus mutans ATCC 25175, Streptococcus sobrinus ATCC 27609 e Streptococcus sanguis ATCC 10557) gerando halos de inibição quando utilizado o extrato puro e diluições 1:2 e 1:4. Os resultados incentivam a realização de novas pesquisas que viabilizem a produção de compostos com finalidade terapêutica que possam ser utilizados clinicamente na odontologia.

This study evaluated the action of ethanolic extract of Myrciaria cauliflora (Mart.)O.Berg leaves on three Streptococcus cultures from dental plaque. Antimicrobial activity was assessed by agar-well diffusion method. The obtained data were satisfactory for all assayed species (Streptococcus mutans ATCC 25175, Streptococcus sobrinus ATCC 27609 and Streptococcus sanguis ATCC 10557) yielding inhibition halos when the pure extract and 1:2 and 1:4 dilutions were used. These results encourage new studies for the production of therapeutic compounds to be used in clinical dentistry.

The aim of this study was to determine the value of blood culture as a parameter of treatment effectiveness in experimental histoplasmosis. A total of thirty five hamsters, weighing approximately 120g, were inoculated intracardiacly with 0.1 ml of a suspension containing 4 x 10(7) cells/ml of the yeast phase of H. capsulatum. Treatments were started one week after the infection and lasted for 3 weeks. The azoles, (itraconazole, saperconazole and fluconazole) were administered once a day by gavage, at a dose of 8 mg/kg; Amphotericin B was given intraperitonealy every other day at a dose of 6mg/kg. Blood samples (1 ml) were obtained by heart punction from the 4th day after infection and were seeded in Sabouraud honey-agar and BHI-agar. The hamsters that survived were killed one week after treatment completion and the following criteria were considered for treatment evaluation: 1) rate of spontaneous death, at the end of the experience; 2) microscopic examination of Giemsa smears from liver and spleen and 3) determination of CFU in spleen cultures. Amphotericin B was the most effective drug, with negative blood cultures at day 20, negative spleen cultures in all cases and all the animals survived until the end of the study. Fluconazole was the less effective drug, blood cultures were positive during the whole experience, spleen cultures showed a similar average of CFU when compared with the control animals and 42.8% of these animals died. Saperconazole and itraconazole showed a similar activity, with survival of all hamsters and negative blood cultures at 23 and 26 days respectively. Blood culture seems to be valuable parameter for treatments' evaluation in experimental histoplasmosis of the hamster.

El propósito de esta investigación fue determinar el valor de los hemocultivos para juzgar la eficacia de los tratamientos en la histoplasmosis experimental. Treinta y cinco hamsters fueron inoculados por via intracardíaca con 0.1 ml de una suspensión de la fase levaduriforme del H. capsulatum equivalente a 4 x 10(7) células/ml. Los tratamientos comenzaron 1 semana después de la infección y se mantuvieron durante 3 semanas. Los compuestos azólicos, itraconazol, saperconazol y fluconazol se administraron por gastroclisis, una vez al día, a razón de 8mg/kg de peso; la anfotericina B fue aplicada por via intraperitoneal día por medio, en dosis de 6mg/kg. Se obtuvieron muestras de sangre para hemocultivo (1 ml) a partir del 4º día post-infección y se sembraron placas de agar-miel de Sabouraud y agar infusión de cerebro y corazón. Los animales que sobrevivieron fueron autopsiados y se tomaron en consideración los siguientes parámetros: 1) tasa de muertes espontáneas al finalizar la experiencia; 2) resultados de los exámenes microscópicos de extendidos de hígado y bazo teñidos com Giemsa y; 3) UFC en cultivos de bazo. La anfotericina B fue la droga más eficaz, los hemocultivos de los animales tratados fueron negativos a partir del 20º dia de tratamiento, se negativizaron los cultivos de bazo y la totalidad de los hamsters sobrevivió. El menos eficaz fue el fluconazol que no modificó los resultados de los hemocultivos y los cultivos esplénicos y se registró el 42.8% de muertes espontáneas durante el estudio. Saperconazol e itraconazol exhibieron una eficacia similar, no se observaron muertes en los animales tratados y los hemocultivos se negativizaron a los 23 y 26 dias de tratamiento respectivamente. Los hemocultivos resultaron ser útiles como criterio para evaluar la eficacia terapéutica de las drogas antifúngicas en este modelo experimental de histoplasmosis.